帕特里克Roisen

作为教育学。斯坦福大学,
多次获得教学奖项

Patrick已经教AP生物学14年了,是多个教学奖项的获得者。

感谢收看本期视频。

解锁所有5300个视频,开始你的免费试用。

RFLP - DNA指纹

帕特里克Roisen
帕特里克Roisen

作为教育学。斯坦福大学,
多次获得教学奖项

Patrick已经教AP生物学14年了,是多个教学奖项的获得者。

分享

因为DNA对每个人都是独一无二的,我们可以用DNA指纹分析将基因信息与信息来源的人进行匹配。限制片段长度多态性技术(RFLP)用限制性内切酶“切掉”可能是分化因素的基因。用凝胶电泳按大小分离。形成的模式将是特别独特的,因为在检测的基因中有更多的可变性。

当我刚上大学的时候,DNA指纹开始进入流行知识库,人们都在谈论这种可以用来识别人的DNA技术,几乎被认为是一件神奇的事情。事实上,我有一个英语专业的朋友他非常自信他知道DNA指纹是什么。我记得他向别人解释说,如果你留下一个指纹科学家可以提取你的一点指纹把它放入培养皿中,然后生长出一个全新的你的副本然后观察你的克隆体的脸,用这种方法识别你。

不幸的是,它不是这样工作的,它有一点复杂,有一点不那么复杂在不那么复杂的一边。两大类型的DNA指纹图谱有一个叫做PCR,我现在要讲的叫做RFLP很长,对不起,有一个很短的版本的实际名称限制片段长度多态性但DNA指纹分析的基本思想无论如果你检查DNA RFLP、PCR是用在这种情况下,RFLP和测量工具,称为DNA凝胶电泳去做检查。如果我们看一下限制性片段长度多态性这个巨大的标题这意味着什么?关于片段和长度,限制性片段是当一种特殊的切割酶叫做限制性片段酶切割DNA聚类是一个词根词你们很多人都知道它的意思是很多,morph的意思是形状,所以多态性意味着你可以在人们的DNA片段长度中看到不同的大小或形状。所以RFLP的基本思想是你在使用限制性内切酶,一种专门的酶,它将DNA切割成高度特定的序列将DNA切割成不同的长度。

每个人因为我们的DNA每个人都是不同的最终会产生不同的片段长度模式。然后你使用这个叫做凝胶电泳的过程。那是什么?凝胶电泳使用的是一种凝胶,典型的琼脂糖,看起来有点像凝胶,没有添加任何食物,你让电流通过它。现在DNA带负电荷,所以它被电场从负极向正极移动,较小的DNA片段可以比较大的DNA片段更快地通过凝胶。让我们看一下这张幻灯片希望我们能更好地了解RFLP限制片段长度多态性是如何工作的。

假设我们有样本1和样本2,这是两个不同的DNA来源。现在我有一个限制性内切酶,它寻找序列GAATC,所以它沿着这个DNA,经过GAATC,在这里切断它。它继续下去,不会再找到那个序列。在样本中,一条到另一条链上记住DNA链是反平行的它们向相反的方向移动一个限制性内切酶沿着这条链经过GATTC并在那里切断它。最后得到的是这里的这个片段比较短这里的这个片段比较长。现在样本2来自另一个人在这个特定的位点上有不同的序列而不是GAATC它们有GTATC限制性内切酶会说,GTA无所谓,忽略它同样的GAT也忽略它。

好了,样本2的DNA最后没有被切割所以它很长,我们取样本1的DNA把它放入凝胶的一个洞或井中取样本2的DNA把它放在那里然后假设我们有一个足够大的样本因为你不能看到一个DNA分子你需要几百万个DNA分子一起才能用肉眼看到它。我们把一号人的DNA样本放进这个孔里,把二号人的DNA样本放进这个孔里然后设置好电流凝胶的这一边带负电,排斥DNA这一边带正电,吸引DNA DNA链就会开始穿过。

因为我们在样本2中有一大堆相同的DNA分子,它们很难通过这个障碍。而在样本1中,我们有两种不同的DNA片段样本,矮个子的DNA片段是快速移动的,而较大的DNA片段是缓慢移动的,没有快速的冈萨雷斯那么快从这里走到这里。然后我们关闭电流,然后我们可以添加特殊的染色剂,使DNA可见,然后我们可以看到我们的模式。你可以在80年代和90年代使用这种模式来识别嫌疑人。它也被大量用于人类genon项目的一些初始绘图工作和标准研究。在基因工程中,当你必须切割DNA时这是一个非常简单和快速的方法来决定你是否成功。

©2021 Brightstorm, Inc.保留所有权利。 条款·隐私