帕特里克Roisen

作为教育学。斯坦福大学,
多次教学获奖

帕特里克教授AP生物已有14年,是多个教学奖项的得主。

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DNA复制

帕特里克Roisen
帕特里克Roisen

作为教育学。斯坦福大学,
多次教学获奖

帕特里克教授AP生物已有14年,是多个教学奖项的得主。

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当你看着一个人的时候,你实际上是在看一个由大约一万亿克隆细胞组成的生物,所有这些细胞一起工作,做一些事情,比如走路,长皮肤,或者想出新的真人秀节目。那么为什么每个细胞都有几乎相同的DNA呢?答案是DNA复制,DNA合成的过程。

DNA是生物学中的一个重要课题。所以在选择题和作文部分都会有关于DNA复制的问题。所以我要做的是,我要先快速回顾一下DNA合成的概况,以及它在细胞周期中的重要性。然后我会深入了解整个过程是如何开始的。然后我会讲它是如何继续的,然后像这个介绍一样,我会告诉你们它是如何结束的。

如我所说,DNA复制对细胞分裂很重要。那什么时候呢?事实证明,细胞的大部分生命都在一个叫做间期的阶段中度过。如果你学过细胞分裂,你应该知道这一点。所以生命周期的这个阶段,这个间期是细胞生长并经历正常过程的时候。当细胞准备开始细胞分裂时,它需要确保它有两个正在被创造的子细胞的DNA。这就是DNA复制的开始。

在那之前,DNA以一种叫做染色质的形式存在。染色质是缠绕在组蛋白池周围的松散的DNA。然而,当它准备好进行DNA合成时,它必须准备好开始复制。

记住,在细胞的细胞质和核质中有大量的核苷酸。他们来自哪里?当你吃以前是活的东西时,你可以把它的DNA切成单个的核苷酸。此外,如果需要的话,你还能得到一些酶,它们可以制造DNA复制中需要的原料。

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让我们进一步了解一下DNA复制是如何开始的。首先,如果你要复制它,你必须打开螺旋。这就产生了这些被称为复制气泡的开口。对于原核生物,比如细菌,它们只有一个DNA分子。它是一个圆圈,它甚至没有缠绕在组蛋白上。所以DNA复制的整个过程,虽然它在分子水平上的行为很像真核DNA复制,但原核DNA复制只从一个复制泡开始。这发生在一个叫做“原点”的地方。一个气泡不断膨胀,直到它绕着圆转,最后你得到了两个新的环状DNA分子。

像你我这样的真核生物,我们有更多的DNA。你的一个细胞里有大约六英尺长的DNA。所以如果你只是从一个地方开始,或者在46条染色体上,如果你只是从那里开始,每个染色体一个,这将会花费太长时间。相反,你的DNA上有很多复制泡。

发生的事情是,你开始按照腺嘌呤连接到胸腺嘧啶,鸟嘌呤连接到胞嘧啶的标准碱基配对规则进行复制。这就是夏加夫法则。随着时间的推移,您将看到我们的复制气泡将不断扩大,直到它们最终合并。然后他们的努力结合在一起。我们最终得到了两个新的DNA分子。值得注意的是,我们最初的DNA分子是红色的,我们正在建造的新DNA分子是蓝色的。你会看到两个分子,两个双螺旋中的每一个,一条是旧的,一条是新的。

这被称为半保守。这将是一个好主意,万一他们问一个关于这个的论文问题。你读到了一个用来证明DNA复制确实是通过半保守复制完成的实验。我会给你一个简短的提示。

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他们所做的是用一种同位素标记旧的原始模板DNA使其链比正常链重。然后通过允许使用不同的同位素来构建新的链,从而使新的链由更轻的材料构成。

现在在这个概述中,DNA复制听起来很简单。实际上,它的核心是一个非常简单的过程,詹姆斯·沃森和弗朗西斯·克里克能够通过观察DNA的结构来理解这个过程。对于很多生物学入门课程来说,我刚才做的概述已经足够好了。但是美联社的生物专家和一些生物老师,希望你知道更多。所以,让我们开始深入研究它。

现在你要知道的第一件事是,我们需要一种打开螺旋的方法。我们来看看这是怎么回事。就像你要抄课本一样,你需要先打开它。这是你的老师一直告诉你的事情之一。如果他们想让你阅读课本并做笔记,你就得打开课本。让我们来看看DNA分子。

这里有一个模型。现在,我要把这个打开。我怎样才能打开这个?我需要酶。能打开螺旋结构的酶叫什么?解旋酶。记住-ase是指酶。现在我来表示解旋酶。我在做的是每一个木制的东西代表一个碱,这里的小木销钉代表氢原子使两边相互吸引。

解旋酶就在那里,把它打开。所以它消失了,见鬼,它自己关闭了。我该怎么办?记住,氢键是在氮基的正负部分有微弱的吸引力。它们就像分子尼龙搭扣。如果你曾经打开过尼龙搭扣运动鞋的带子,然后松开带子,它就会掉下来重新合上。所以我们需要的是,我们需要一种蛋白质来结合或粘附在这些单个支架上,使它们保持为单链。

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结合在单链上的蛋白质叫什么?我称之为单链结合蛋白。看到那个词了吗?它会告诉你它到底是什么。这是在科学课上取得好成绩的诀窍之一,就是弄清楚这些名字的意思。你想想,你可以编一个名字。在一篇AP生物论文中,先把名字编出来。你可能会欺骗读者,让他们觉得你知道的比他多,或者他会想,哦,糟糕,这是西海岸的叫法,而我是东海岸的教授,反之亦然。

我们来看看这是怎么回事。这里我们看到了DNA的双螺旋结构,我们要把它打开。这里有个问题。让我们快速回顾一下DNA的结构,因为你需要知道这些东西才能在DNA复制上取得好成绩。我们看这个,蓝色的标记是5。那指的是什么?如果你还记得,DNA核苷酸有三个组成部分。这是磷酸,五碳糖,和氮碱。

脱氧核糖糖是构成核苷酸骨架的物质。磷酸盐附着在脱氧核糖环周围的第五个碳上。这里的5是指,这是DNA分子糖磷酸骨架的磷酸端。所以如果这是5'-磷酸端,那么它应该是5'-磷酸。那么3'指的是糖上的一种碳,脱氧核糖糖。

下一个DNA核苷酸将其5'-磷酸连接到原始DNA核苷酸3'-碳。所以它应该是5'-磷酸,3'糖。5到3,5到3,5到3糖,磷酸盐,糖,磷酸盐,糖,磷酸盐,糖,磷酸盐,糖。那应该是3。让我们继续,让它成为1。你需要知道怎么做。你需要知道。这是3号。在DNA链的一端,应该是数字5,或者5素数,只要在上面加一个小撇号就可以了。另一端应该是3。

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现在你知道詹姆斯·沃森和弗朗西斯·克里克发现的一件事,就是DNA双螺旋的两边,并不是朝着同一个方向。它们实际上是相反的方向。如果这是5'端,蓝色的是3'端,那么如果这是红色的3'端,这里应该是红色的5'端。

这似乎是一个挑剔的细节,但这些挑剔的细节会出现在AP生物考试中。特别是,如果你能把它们写进文章里,你就多得了一分。再说一遍,你只是想在每篇文章里积累10分。如果你能得3分或4分,那你的成绩一般或及格。

现在我们已经打开了螺旋,让我们看看它是如何开始的。实际发生的是,实际上生成DNA的酶,也就是DNA聚合酶,不能开始生成新的DNA链。这是一种防止突变的保护,因为在任何DNA链或任何种类的核酸中,最开始的几个碱基,被加入的那几个碱基,更有可能是错误或突变。

所以作为一种保护措施,因为要记住,你要在没有任何错误的情况下复制你的DNA。因为记住,你的DNA保存着如何构建和操作你的细胞的指令。所以它开始使用的不是DNA,而是RNA。这标志着第一个,也许是10个左右的核苷酸因为这些可能是错误的。稍后你会带着校对酶回来你会移除RNA然后非常小心地用DNA替换它们。这些开始的部分,我用白色表示我用RNA的地方。

既然我告诉你们DNA聚合酶是构建DNA的酶,如果我用RNA来制造这个,你知道它一定是一种RNA聚合酶。它是。

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现在有很多不同种类的RNA聚合酶。在这种情况下,因为我们正在构建RNA引物,也就是DNA复制过程中这个短片段的名字。因为我们要构建引物,所以我们要用一种叫做引物酶的酶。所以它会建5到3英尺。这是什么意思?这意味着这里有一个核苷酸的磷酸,这里有一个糖或3'端。你可以把新的DNA或RNA链想象成康茄舞线。5英尺的末端是手指的位置,3英尺的末端是头和肩膀1 2 3,这是5。

当你在跳康茄舞的时候,一个人在开始,然后每个人都在他们的3'末端加上。在康茄舞队伍中插队是非常不礼貌的。我们要用核酸做一条康茄舞线。有道理吗?

现在你注意到我在这里和这里建立了一个引物。这表示了复制过程中发生了什么,对于这个分支事件。这样我就可以复制这条边了。我有一些引物,因为我也想复制复制叉上发生的事情。现在让我们来看看会发生什么。

还记得DNA聚合酶吗,我说过那是可以合成DNA的酶?它走过来,说,“哦,看底漆。我可以添加到已经存在的头发上。”和它。它开始延伸底漆。但是现在,我们用的不是白色的RNA,而是不同颜色的DNA。

我把DNA核苷酸加到这个末端。你可以把初级教士想象成在派对上开始康茄舞的人。我们大多数人都很害羞,不敢这么做,因为我们看起来就像彻头彻尾的码头。但是一旦康茄舞结束了,嘿,你可以跳上去。这就是人们在这里所做的。核苷酸进来了,延伸到这里,那里。所以我们在做康茄舞线我们的DNA链。

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现在的问题是,我们正在攻击复制叉。到目前为止,一切都很简单。是啊,引物-引物的事有点奇怪,但到目前为止,我觉得一切都还好。到目前为止,你已经做得很好了。在大多数生物课上,这是给孩子们带来问题的下一步。如果你有任何问题,请举手,我会点名的,因为我们正在录音。

让我们继续,看看当DNA聚合酶击中复制叉时会发生什么。那我们该怎么办?所发生的是我们的budyy螺旋酶只是打开了更多的复制级别。我们在这里打开叉子,在那里打开叉子。记住,在这一边发生的事情也在这一边发生。那么会发生什么呢?好吧,在这里,这条成长中的河流,这条成长中的康加河,没问题。你只是不断添加越来越多的核苷酸。在这里,这条链也朝着这个开放复制分支的方向增长。因此,我们可以在那里增加我们的成长链。

但在这里,这条链正在远离复制分支。在这里,这条链正在远离复制分支。那我们该怎么办?我们在这里暴露了DNA核苷酸。我们怎么才能把它们复制下来?这是我们的朋友primase。它进来说,“嘿,DNA聚合酶,你需要在这里开始另一个conga系列。”Primase构建了一个RNA引物,这将是我们的DNA聚合酶出现并开始加入的信号。

因为这一边沿着复制叉的方向,不断地生长,从这里到那里,这被称为先导链。

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但是在这里,因为我们需要用引物在这里建立一个新的引物,我们最终会形成一小段核苷酸,因为我们必须不断地建立这些一遍又一遍。这被称为滞后链。现在,数据作为DNA复制模式的证据,科学家们提出了他们的理论和想法。但真正发现这些的人,并明确证明了这就是事情的运作方式,他的名字当然是冈崎博士。我怎么知道的?因为我们称这些片段为冈崎片段。

所以这里的这条链,因为它需要不断地重复,是滞后链。这条链是前导链。类似地,因为这个反平行结构,在这里,这部分叫做滞后,这部分叫做超前。

这对很多孩子来说真的很复杂,他们仍然认为,“我不太明白。”让我给你一个类比,也许能帮助你理解复制叉发生了什么。我要做的是用教科书来表示DNA分子。

这是一本很重的教科书。假设你的老师说我们需要一份。现在你和你的朋友要做的是,你决定好吧,我们每人抄一半的课本。所以你要做的就是打开它。这就像解旋酶打开螺旋。我们只做复制叉中的一个。

假设你的朋友决定复制这一边而你们决定从课本中间开始,然后你们每个人都从自己负责的那一边开始复制。所以你的朋友会从这一页一直复制到最后。你要从这一页开始抄写。就像我们复制这条蓝色和红色的链。

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现在你要面对的问题是,这就是为什么你的朋友比你聪明。记住,就像DNA一样,聚合酶只能在5到3 '的方向建立,你只能从左到右的方向读写。所以你的朋友没有问题。他从一开始就开始抄袭,就在这里,他开始抄袭。现在,当他完成他的那一半的时候,他已经走得很远了。当他开始读的时候,他继续翻页。另一方面,你从这里开始。到目前为止还不错,就像这样,哦,不,你遇到了你朋友在做的事情。记住,你不是在模仿他的那一半,你是在模仿你的那一半。那你要怎么做? You have to turn the page the other direction.

但是如果你不继续在这张纸上写,如果你开始加这个就没有任何意义了。相反,你需要开始一张全新的纸。哦,不,我们还得再写一张纸,因为记住你的工作是复制书的前半部分。

你将相当于落后的一股,每一张纸都代表着一页的努力价值,就是冈崎的碎片。你的伙伴正在朝着这个打开的复制叉的方向成长,他将有一个连续的卷轴,可能有几百英尺长。但他会一直坚持下去,直到走到尽头。他领先,你落后,因为你必须重新开始,因为你的开场白与你所模仿的相反。这对你有意义吗?

现在你知道我们要构建的不是一个完整的DNA分子,而是一堆冈崎片段的小块。我们试图合成两个完整的DNA分子。我们怎么做呢?或者就像我们试着抄课本一样?你是如何利用你朋友的所有努力和你的几张装订纸,把它们组装成一本新的教科书的?让我们看看你的细胞做什么。

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记住,这曾经是冈崎的一小段。这是前导链。当构建冈崎片段的DNA聚合酶碰到之前的RNA引物时,它会停止并说有人在这里。这是什么?另一种酶,一种RNA,这意味着它会把RNA切碎然后说,"引物出去"它去除RNA核苷酸。然后另一种不同的DNA聚合酶,但它是同一种分子。当每个RNA核苷酸被移除时,一个新的DNA被加入。

这一次我们可以使用这些RNA或DNA聚合酶的各种复制编辑功能。他们可以仔细检查,确保我们在有T的地方输入正确的A,在有C的地方输入正确的G,等等。但是,我们仍然会有一个DNA分子紧挨着一个DNA分子;两个DNA片段。

我们如何将它们结合在一起?这就是最后一种酶的作用,连接酶。DNA连接酶或者简称连接酶,是将冈崎片段连接在一起的酶。你需要了解DNA连接酶。不仅仅是DNA复制,如果你读过基因工程,科学家们会说,“嘿,有一种酶能把DNA片段连接在一起吗?”因为这样我们就可以把不同生物的DNA片段连接起来。我们可以用这个DNA连接酶加入新的DNA分子。

有些人可能会说连接酶,这是个奇怪的词。事实上,你知道这意味着什么。-Ase当然是指酶,没错。联赛是什么意思?你知道其他以联赛开头的单词吗?是的,你做的事情。你关节里有什么?是什么把你的关节固定在一起的?韧带。西甲意味着平局、捆绑或加入。 So they could have called it ‘joinase’, but then everybody would know what they mean, and nobody would have to pay a scientist to explain these things.

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所以科学家们说,嘿,我们都叫它连接酶吧,那样就没人知道我们在说什么了。连接酶将冈崎片段连接在一起。差不多就是这样结束的。

DNA聚合酶继续进行。当我们打开更多的气泡时,我们的引物就形成了引物。然后DNA聚合酶过来说,“哦,我应该从这里开始,”然后它就开始了。我们继续,直到最后到达DNA分子的末端。这就是我们在这里看到的。一旦它被释放,现在这些新的链,注意我们有两条链在这里形成。它开始卷曲成双螺旋。这里和这里形成了一个螺旋。一旦完成,我们就有两个独立的分子。这是DNA复制。

现在回顾一下,DNA复制是关于制造原始DNA分子的完全相同的副本。让我们快速地过一遍。

你要做的第一件事就是打开螺旋线。幸运的是,由于这个碱基配对规则,我们可以将As添加到Ts,Gs添加到Cs。打开螺旋的酶,就是螺旋酶。然后我们使用单链结合蛋白使其保持单链。

接下来,RNA聚合酶称为引物酶,构建引物。这使得DNA聚合酶开始继续拉长这些链。当我们打开更多的螺旋,在后面,你必须重新开始用引物建立链的开始DNA聚合酶来延伸它。在领先的一边,它正朝着开始分叉的方向生长。所以它不需要这样做。

最终,DNA聚合酶来了,用DNA取代引物RNA核苷酸。然后我们的连接酶把冈崎片段连接在一起。最终你会得到两个新的DNA分子,它们都被包裹起来了。就是这样。

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我强烈建议大家再看一遍这个视频熟悉酶的名字。但一旦你弄清楚了它们的名字,事情就简单多了。但这就是DNA复制。

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